D-二聚體排除試驗(yàn)試劑盒（酶聯(lián)免疫熒光法）說(shuō)明書(shū)

【產(chǎn)品名稱(chēng)】 通用名稱(chēng)：D-二聚體排除試驗(yàn)試劑盒（酶聯(lián)免疫熒光法） 英文名稱(chēng)：VIDAS D-Dimer Exclusion II (DEX2)

【包裝規(guī)格】 60 測(cè)試/盒

【預(yù)期用途】 本產(chǎn)品用于體外定量檢測(cè)人血漿（含枸櫞酸鹽）中的纖維蛋白降解產(chǎn)物（FbDP）。 D-二聚體排除試驗(yàn)試劑盒（酶聯(lián)免疫熒光法）是一種在 VIDAS 系列分析儀上使用的自動(dòng)定量試驗(yàn)，使 用 ELFA 技術(shù)（酶聯(lián)免疫熒光分析）。 VIDAS D-二聚體排除試驗(yàn) II 與臨床可能性評(píng)分診斷模型相結(jié)合，用于排除可疑患有 DVT（深靜脈血栓） 或 PE（肺栓塞）的門(mén)診病人是否患有這兩種疾病。纖維蛋白降解產(chǎn)物（FbDP）是一些高度異質(zhì)性的可溶性 片段， 在兩個(gè)同步進(jìn)行的生理反應(yīng)發(fā)生時(shí)出現(xiàn)在循環(huán)系統(tǒng)中（1）。 凝固，可溶性纖維蛋白原在凝血酶及因子 XIIIa 作用下凝固成不溶性的穩(wěn)定的纖維蛋白。 纖維蛋白溶解，纖溶酶使纖維蛋白凝塊溶解。 D -二聚體片段是這個(gè)過(guò)程的最終產(chǎn)物（2）。 雖然 FbDP 的大小各不相同，但他們都具有一個(gè)或多個(gè) D -二聚體抗原決定簇（1，2）。因此，將 FbDP 統(tǒng)稱(chēng)為“D -二聚體"。由于單克隆抗體能夠特異性識(shí)別纖維蛋白抗原表位，因此 D -二聚體試驗(yàn)可以直接檢 測(cè)血漿中的 D -二聚體，而與纖維蛋白原及其降解產(chǎn)物來(lái)無(wú)交叉反應(yīng)（1）。 D -二聚體反映穩(wěn)定的纖維蛋白的存在，使得此標(biāo)志物成為靜脈血栓栓塞（VTE）的診斷的有用工具（3）。 基于 ELISA 技術(shù)的 D -二聚體定量檢測(cè)在反應(yīng)阻斷血栓的存在方面靈敏度很高，因此，在排除靜脈血栓栓塞 性疾病方面十分有價(jià)值（4，5）。 結(jié)合臨床可能性評(píng)分診斷評(píng)估，當(dāng) D -二聚體濃度低于預(yù)定的臨界值（由嚴(yán)格的臨床研究決定）時(shí)， 它可以在可疑門(mén)診病人中安全地排除深靜脈血栓癥（DVT）和肺栓塞（PE）的診斷（5-7）。D -二聚體 ELISA 檢測(cè)在可疑 DVT 或 PE 患者診斷工作中的臨床實(shí)用性在于可以顯著減少影像學(xué)檢測(cè)的次數(shù)，同時(shí)會(huì)使診斷 總成本相應(yīng)減少（8，9）。D -二聚體并非特異性的存在于 DVT / PE 中，在凝血和纖溶激活時(shí)的其他各種條 件（如手術(shù)，外傷，感染，炎癥，妊娠，）下也可觀察到其水平升高（3）。因此，由于住院患者伴有可升 高 D -二聚體水平的合并癥比例很大，在使用 D -二聚體排除 DVT 或 PE 時(shí)，其應(yīng)用性較低（5,10）。某些情 況導(dǎo)致 D -二聚體結(jié)果可能會(huì)低于預(yù)期而出現(xiàn)假陰性。因此，當(dāng)可疑 DVT / PE 患者的臨床可能性評(píng)估預(yù)發(fā) 生概率較高、DVT/PE 的癥狀持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)（超過(guò)一個(gè)星期）或已在進(jìn)行抗凝治療時(shí)，使用 D -二聚體排除 DVT/PE 并不安全（10，11）。 D -二聚體測(cè)定也可用來(lái)輔助診斷彌漫性血管內(nèi)凝血（DIC）（12）。

【檢驗(yàn)原理】 采用酶聯(lián)免疫夾心兩步法和最后的熒光檢測(cè)（ELFA）相結(jié)合的分析原理。 固相管（SPR），既作為固相將抗 FbDP 單克隆抗體吸附在其表面，也作為移液裝置。分析試劑是即用 型，并分裝于密封的單次使用的試劑條中。 所有分析步驟都由儀器自動(dòng)進(jìn)行。反應(yīng)介質(zhì)在固相管中循環(huán)進(jìn)出數(shù)次。 首先固相管吸取樣品、稀釋?zhuān)缓笤诠滔喙苤醒h(huán)進(jìn)出幾次。抗原與包被于固相管上的抗 FbDP 免疫 球蛋白相結(jié)合。未結(jié)合的成分在清洗步驟中去除。 在第二步中，包含一個(gè)堿性磷酸酶標(biāo)記的抗 FbDP 單克隆抗體的共軛物與包被在固相管上的抗原相結(jié) 合，形成 “三明治"結(jié)構(gòu)。未結(jié)合的成分在清洗步驟中去除。然后進(jìn)行檢測(cè)。底物（磷酸 4-甲基傘形烷） 在固相管中循環(huán)進(jìn)出幾次。共軛物酶催化底物水解為熒光產(chǎn)物（4-甲基傘形酮），其熒光強(qiáng)度可在 450 nm 處測(cè)量。熒光強(qiáng)度與樣品中的抗原濃度成正比。 IVD D-二聚體排除試驗(yàn)試劑盒（酶聯(lián)免疫熒光法） 版本號(hào) 14219 E-CN-2015/01 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，儀器會(huì)根據(jù)存儲(chǔ)于其中的校準(zhǔn)曲線自動(dòng)計(jì)算結(jié)果，然后打印一份報(bào)告。

【主要組成成份】 試劑盒組成（60 個(gè)測(cè)試）-試劑重組： 60個(gè)D-二聚體排除試驗(yàn)試劑條 STR 即用型。 60（2x30）個(gè)D-二聚體排除試驗(yàn) 固相管 SPR 即用型。 固相管內(nèi)表面用抗FbDP單克隆免疫球蛋白（小鼠）包被。 D-二聚體排除試驗(yàn)對(duì)照品： C1 對(duì)照品 2x2mL(凍干) C2 對(duì)照品 2x2mL(凍干) C1 C2 用2mL蒸餾水重懸。靜待5分鐘，然后混合。 重懸后，在2～8℃保存28天，或在-25±6℃保存至試劑盒的有 效期（重懸后立即凍結(jié)）。 反復(fù)凍融不可超過(guò)5次。 從用甘氨酸－小牛白蛋白緩沖液稀釋的人類(lèi)血漿*中提取的 FbDP+防腐劑。 MLE數(shù)據(jù)標(biāo)出了置信區(qū)間，單位mg/L（FEU）（“質(zhì)控品C1濃度 范圍"或“質(zhì)控品C2濃度范圍"）。 D-二聚體排除試驗(yàn)校準(zhǔn)品： S1 校準(zhǔn)品： 2x2mL(凍干) S1 用2mL蒸餾水重懸。靜待5分鐘，然后混合。 重懸后，在2～8℃保存28天，或在-25±6℃保存至試劑盒的有 效期（重懸后立即凍結(jié)）。 反復(fù)凍融不可超過(guò)5次。 從用甘氨酸－小牛白蛋白緩沖液稀釋的人類(lèi)血漿*中提取的 FbDP+防腐劑。 MLE數(shù)據(jù)標(biāo)出了校準(zhǔn)品濃度，單位mg/L（FEU）（“校準(zhǔn)品S1濃 度范圍"），同時(shí)標(biāo)出了以“相對(duì)熒光值"表示的置信區(qū)間（校 準(zhǔn)品S1 RFV范圍）。 D-二聚體排除試驗(yàn)稀釋液 1x5 mL(液體) R1 即用型。 Tris緩沖液（0.05mol/L、pH=7.4）、小牛血清、防腐劑。 校準(zhǔn)測(cè)試所需的出廠主數(shù)據(jù)規(guī)格書(shū)： 試劑盒提供了 MLE 數(shù)據(jù)（主批次輸入） 或者 包裝盒標(biāo)簽上印有MLE條形碼 *本品已經(jīng)經(jīng)過(guò)檢測(cè)顯示 HBs 抗原陰性，HIV1、HIV2 和 HCV 抗體陰性。不過(guò)，由于尚無(wú)一種試驗(yàn)方法能夠*保證沒(méi)有這些 物質(zhì)，所以本產(chǎn)品必須按照具有潛在的感染性進(jìn)行處理。因此，處理當(dāng)中應(yīng)該采取常用的安全措施。 固相管（SPR） 生產(chǎn)過(guò)程中將固相管內(nèi)表面用抗 FbDP 單克隆免疫球蛋白（小鼠）包被。每個(gè)固相管用 DEX2 代碼標(biāo)識(shí)。 在開(kāi)袋僅取出所需要的固相管后，小心將儲(chǔ)存袋密封好。 試劑條 試劑條包括 10 個(gè)孔，并覆蓋帶有標(biāo)簽的金屬箔片。標(biāo)簽包括一個(gè)條形碼，主要表示檢測(cè)代碼，試劑 盒的批號(hào)和有效日期。第一個(gè)孔的金屬箔片被打孔，以便加入標(biāo)本。每個(gè)試劑條的最后一個(gè)孔都是一個(gè)熒 光讀數(shù)孔，可以在其中進(jìn)行熒光測(cè)定?？梢赃M(jìn)行熒光閱讀。在試劑條的中間部分孔包含需要檢測(cè)的各種試 劑。 DEX2 試劑條的描述 孔 試劑 1 樣本孔。 D-二聚體排除試驗(yàn)試劑盒（酶聯(lián)免疫熒光法） 版本號(hào) 14219 E-CN-2015/01 3 2、3、4 空白孔。 5 共軛物：TRIS緩沖液（0.05 mol/L，pH=6.5）中堿性磷酸酶標(biāo)記的抗FbDP單克隆免疫球蛋白 （小鼠）、馬血清、防腐劑（400μL）。 6、7、9 清洗緩沖液：TRIS緩沖液（0.05 mol/L，pH=7.3）、化學(xué)穩(wěn)定劑、防腐劑（600μL）。 8 稀釋液：TRIS緩沖液（0.05mol/L的，pH=7.4）、小牛血清、蛋白和化學(xué)穩(wěn)定劑、防腐劑（600μL）。 10 含底物的熒光讀數(shù)孔：磷酸4-甲基傘形烷（0.6mmol/L）、二乙醇胺（DEA）（0.62 mol/L或6.6％） PH=9.2 ±1g/L的疊氮鈉（300μL）。 * *警示詞：危險(xiǎn) 危害： H318：造成嚴(yán)重眼部刺激。 預(yù)防措施： P280：配戴防護(hù)手套/護(hù)目鏡/面罩。 P305+P351+P338：如入眼：用清水小心沖洗數(shù)分鐘。如果配戴隱形眼鏡并方便摘除，摘除隱形眼鏡后 繼續(xù)沖洗。 詳情參見(jiàn)“材料安全性數(shù)據(jù)表"。 必需但試劑盒中未提供的材料及耗材： 使用一次性吸頭的移液器，用來(lái)分配 2 至 200ml 的液體。 無(wú)粉末的一次性乳膠手套。 對(duì)于其他具體的材料和用品，請(qǐng)參照儀器操作手冊(cè)。 VIDAS 系列儀器。

【儲(chǔ)存條件及有效期】 2～8℃儲(chǔ)存，有效期 12 個(gè)月。 禁止冷凍試劑。 所有未用試劑存于 2～8℃。 打開(kāi)試劑盒后，檢查固相管鋁箔袋密封是否完好且無(wú)損壞。否則請(qǐng)勿使用固相管。 為保持固相管穩(wěn)定性，取出所需 SPR 后請(qǐng)將有干燥劑的袋重新仔細(xì)密封并將整個(gè)試劑盒放回 2～8℃ 按推薦的環(huán)境儲(chǔ)藏試劑盒,可確保所有成份在標(biāo)注的效期內(nèi)穩(wěn)定。 生產(chǎn)日期：詳見(jiàn)外包盒標(biāo)簽。 失效日期：詳見(jiàn)外包盒標(biāo)簽。

【適用儀器】 VIDAS，miniVIDAS，VIDAS 3